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液相色譜在使用過程中的注意事項

更新時間:2022-09-21      點擊次數:1817
  液相色譜在使用過程中的注意事項
  一、色譜柱的問題:
  不同類型的色譜柱,使用一樣的清洗方法會對色譜柱的分析有影響嗎?色譜柱會因品牌的不同都會有不同的對應的清洗要求,可以查找色譜柱的說明書或者查找資料和請教有經驗的色譜工作者進行操作,否則盲目操作有可能會造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短。如果發現柱內條件變化了,需要穩定進樣條件,調節流動相。不少做色譜實驗的技術人員平時可能也會碰上這樣的一個問題:如果不及時補充流動相,泵會將溶劑瓶中的流動相吸干了會不會影響色譜柱呢?答案是不會的!因為泵里面充滿了空氣,但是泵也不會將空氣排入色譜柱的,泵只傳送液體不傳送空氣。液相色譜柱采用不銹鋼制成,色譜柱中填充了鍵合硅膠或聚合物填料,有多種尺寸規格可供選擇。
  二、填料孔徑的選擇:
  可以根據化合物分子量來確認色譜柱填料的孔徑,但我們通常都會選擇C18柱作為普遍使用的色譜條件。因為C18柱是我們使用得比較多的也是對色譜保留性能相對熟悉的。硅膠基質的色譜填料是目前應用特別廣泛的液相色譜固定相基質,其理化性質適用于各種分析和制備分離。 而USHA C18色譜柱填料,具有高選擇和高分離度的特點,廣泛用于分析極性物質和疏水性物質。
  三、使用PEEK管路和接頭:
  如果檢測數量多經常使用色譜儀,需要改變流路或更換不同品牌的色譜柱,使用PEEK材料制成的管路和接頭會方便很多。PEEK管路相對容易連接,PEEK接頭不需要用到工具只需要手擰就可以了,而且還與不同廠家或規格的色譜柱相匹配。PEEK高性能聚合物都能表現出很好的耐磨損性能,能在較大壓力、速度、溫度和接觸面粗糙度范圍內。
  四、出現拖尾、雙峰或出現鬼峰:
  如果是篩板堵塞或柱失效,可以嘗試反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。如果是存在干擾峰的現象,我們可以用長一點的柱子去更換流動相。如果是柱超載,則減少進樣量。如果是出現鬼峰比如進樣閥殘余峰,可能為上次樣品的殘余,可以在每次進完樣后用充足的時間來平衡和清洗系統。鬼峰捕集柱,可以有效的捕集流動相中的雜質和更好的處理鬼峰,從而大大縮短了檢測分析的時間。
  五、工作中的 液相色譜的儀器狀態:
  泵壓直接反映了色譜柱和整個液相色譜系統的狀況,如果壓力過低會有漏液的現象; 如果壓力過高會導致柱子或者管路堵塞;如果壓力波動過大很有可能是因為泵入口處堵塞, 系統內有氣泡,又或者是進樣閥出了故障,所以操作人員平時上機測試的時候要養成隨時注意泵壓的好習慣。
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